以中壓層析柱法提取分離冬凌草甲素為例

　　1.吸附劑的處理及柱子裝填

　　將一定量薄層層析硅膠裝人搪瓷盤置于烘箱中，于105C活化2H后動手能力，取出放置室溫即可裝柱服務品質。柱子采用干法填充，填滿整個(gè)柱體充分，不留死體積過程，密封后用柱塞式計(jì)量溶劑泵按丙酮一石油醚(5:95)比例泵人溶劑，至溶劑流出止重要意義。

　　2.上樣

　　將冬凌草的乙醇提取物400G用適量丙酮溶解規則製定，泵人中壓柱柱頭，然后泵人石油醚1000RID引領。

　　3.洗脫

　　以一定比例的石油醚一丙酮為洗脫液表現明顯更佳，60ML/MIN的流速進(jìn)行梯度洗脫，柱的使用壓力為2~ 3KG/C 優化服務策略。按每份500ML收集技術先進，TLC檢識(shí)展開(kāi)劑丙酮一(2:8)，顯色劑5%香草醛濃硫酸乙醇液

　　至洗脫*技術節能，相同流份合并提高，回收溶劑。將冬凌草甲素流份合并蒸干延伸。加人適量甲醇熱溶后自然放置有很大提升空間，析出結(jié)晶，為冬凌草甲素。

　　4.層析柱再生認為、平衡

　　有效成分經(jīng)TLC檢識(shí)全部流出后，用純丙酮5000ML再生國際要求，丙酮一石油醚(5:95)平衡后紮實，可再次上樣，反復(fù)使用(使用次數(shù)隨原料不同而異新趨勢，一般可連續(xù)使用2-6個(gè)月以上)可能性更大。

　　5.重結(jié)晶

　　冬凌草甲素結(jié)晶析出*后，減壓過(guò)濾新體系，然后用少量甲醇洗滌(洗滌液保留使命責任，作下次熱溶冬凌草甲素用)。將冬凌草甲素再用適量甲醇熱溶后放置效果，結(jié)晶再次析出，待結(jié)晶*后高品質，抽濾，用少量洗滌互動講，將結(jié)晶室溫下晾干后置真空干燥箱中，35度真空干燥至恒重哪些領域。密封于瓶中支撐能力，置干燥器中保存。

　　6.薄層層析分析

　　取適量冬凌草甲素對(duì)照品及由上述方法得到的冬凌草甲素樣品甲醇溶解后點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上像一棵樹，以一丙酮(8:2)為展開(kāi)劑進(jìn)行展開(kāi)協同控製，5% 香草醛濃硫酸乙醇液顯色，于105高效利用。C烘至斑點(diǎn)清晰體驗區。表明在該展開(kāi)系統(tǒng)下，冬凌草甲素樣品和對(duì)照品都具有相同的RF值品質，并呈現(xiàn)出同樣的藍(lán)綠色斑點(diǎn)提供了遵循，在制備的冬凌草甲素樣品中，沒(méi)有雜質(zhì)斑痕能運用。