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了解一下色譜柱的清洗溶劑及順序吧

更新時間:2020-08-17      點擊次數(shù):6285
  色譜柱的清洗溶劑及順序廣泛關註,作為參考:硅膠柱以正已烷(或庚烷)豐富、二氯甲烷和甲醇依次沖洗,然后再以相反順序依次沖洗覆蓋,所有溶劑都必須嚴格脫水服務體系。
 
  甲醇能洗去殘留的強極性雜質,已烷使硅膠表面重新活化重要的作用。反相柱以水特點、甲醇研究、乙腈、一氯甲烷依次沖洗綠色化發展,再以相反順序依次沖洗去創新。
 
  如果下一步分析用的流動相不含緩沖液,那么可以省略后用水沖洗這一步應用創新。一氯甲烷能洗去殘留的非極性雜質體系,在甲醇(乙腈)沖洗時重復注射100~200µl數(shù)次有助于除去強疏水性雜質。
 
  乙腈或甲醇的混合溶液能除去類脂和諧共生。有時也注射二甲亞砜數(shù)次提高。
 
  此外,用乙腈用上了、丙酮和三氟醋酸(0.1%)梯度洗脫能除去蛋白質污染結構。
 
  陽離子交換柱可用稀酸緩沖液沖洗,陰離子交換柱可用稀堿緩沖液沖洗的特性,除去交換性能強的鹽競爭力所在,然后用水、甲醇高效、二氯甲烷(除去吸附在固定相表面的有機物)先進的解決方案、甲醇、水依次沖洗實力增強。
 
  保存色譜柱時應將柱內(nèi)充滿乙腈或甲醇自然條件,柱接頭要擰緊,防止溶劑揮發(fā)干燥。禁止將緩沖溶液留在柱內(nèi)靜置過夜或更長時間。
 
  色譜柱使用過程中設計標準,如果壓力升高深度,一種可能是燒結濾片被堵塞,這時應更換濾片或將其取出進行清洗;另一種可能是大分子進入柱內(nèi)經過,使柱頭被污染;如果柱效降低或色譜峰變形帶來全新智能,則可能柱頭出現(xiàn)塌陷,死體積增大培養。
 
  在后兩種情況發(fā)生時共創美好,小心擰開柱接頭,用潔凈小鋼將柱頭填料取出1~2mm高度(注意把被污染填料取凈)再把柱內(nèi)填料整平高效流通。然后用適當溶劑濕潤的固定相(與柱內(nèi)相同)填滿色譜柱預判,壓平,再擰緊柱接頭有力扭轉。這樣處理后柱效能得到改善調解製度,但是很難恢復到新柱的水平深入。

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