層析柱的裝柱非常重要助力各行,裝柱的效果會(huì)直接影響層析分離效果經過。有濕法裝柱和干法裝柱等兩種方法。濕法裝柱很簡(jiǎn)單互動互補,使用也普遍更加堅強,就是先用比固定相多一倍的洗脫劑將固定相活成勻漿,柱子底部先用脫脂棉塞緊實際需求,然后倒入洗脫劑將脫脂棉中氣泡趕出配套設備。
用漏斗將活好的固定相倒入柱子中,打開(kāi)底部活塞性能,將柱子中高出固定相的溶劑放出建議。期間不斷用橡皮棒敲打,將固定相敲實(shí)設計,做到密實(shí)均勻無(wú)氣泡即可。
很多時(shí)候用加壓的方法可以很高效地裝好柱子,而且在柱子中沒(méi)有氣泡產(chǎn)生設備製造。
干法裝柱與濕法裝柱剛好相反的是有效性,它是將干燥的吸附劑從柱子上端直接加入到一個(gè)空的柱子中高質量發展,然后用油泵抽柱子底部,相當(dāng)于減壓過(guò)柱形勢,直到柱子變得很結(jié)實(shí)攻堅克難,再用淋洗劑“走柱子”。
干法裝柱的一個(gè)缺點(diǎn)就是在裝入洗脫劑后高效節能,由于溶劑和固定相之間的吸附放熱相關,所以柱子容易變花,影響分離效果基地。
解決的方法是:
(1)固定相一定要添加結(jié)實(shí);
(2)一定要用較多的溶劑“走柱子”影響力範圍,直到柱子的下端不再發(fā)燙,恢復(fù)到室溫后再撤去壓力約定管轄。無(wú)論使用哪種方法裝柱雙向互動,最后都要求所裝的柱子結(jié)實(shí)、勻稱(chēng)新創新即將到來、無(wú)氣泡生產效率。

上樣的技巧
上樣也有濕法和干法之分:濕法一般用淋洗劑溶解樣品,也可以用二氯甲烷創新能力、乙酸乙酯等,但溶劑越少越好主動性。再用膠頭滴管轉(zhuǎn)移得到的溶液發展,沿著層析柱內(nèi)壁緩慢地均勻加入。
在不用海沙的情況下範圍,盡量不要破壞硅膠面效果。加樣后,打開(kāi)柱底活塞,讓固定相充分地吸附所加樣品求得平衡。然后再加入一些洗脫劑,再充分地吸附后將一團(tuán)脫脂棉塞至接近硅膠表面道路。
然后就可以放心地加入大量洗脫劑面向,而不會(huì)沖壞硅膠表面。很多樣品在上柱前是粘乎乎的空間廣闊,一般沒(méi)關(guān)系集中展示。有的時(shí)候上樣后在硅膠上又會(huì)析出,這一般都是比較大量的樣品才會(huì)出現(xiàn)規劃,是因?yàn)楣枘z對(duì)樣品的吸附飽和建設,而樣品本身又是比較好的固體才會(huì)析出,這就需要先重結(jié)晶樣品發展,得到大部分的產(chǎn)品后剩余的產(chǎn)品再柱分。
如果不能重結(jié)晶也沒(méi)關(guān)系在此基礎上,直接過(guò)柱就行,樣品會(huì)隨著淋洗劑流動(dòng)而慢慢溶解探索創新,最后隨著洗脫劑流出開展。有些樣品溶解性差,能溶解的溶劑又不能上柱(比如DMF極致用戶體驗,DMSO等強大的功能,會(huì)隨著溶劑一起走,顯色是一個(gè)很長(zhǎng)的脫尾)充分發揮,這時(shí)就必須用干法上柱了與時俱進。
以上就是本篇為您分享的全部?jī)?nèi)容,希望以上的內(nèi)容能夠?qū)Υ蠹矣兴鶐椭鉀Q方案,感謝您的觀(guān)看和支持更優質,后期會(huì)整理更多資訊給大家,敬請(qǐng)關(guān)注我們的網(wǎng)站更新初步建立。