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高壓制備色譜準(zhǔn)備工作要做哪些

更新時(shí)間:2015-07-23      點(diǎn)擊次數(shù):2375
   制備色譜簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō)紮實做,就是在化學(xué)化工醫(yī)藥等廣泛采用的層析法以及薄層色譜。本文介紹下高壓制備色譜的目的以及需要做哪些準(zhǔn)備工作規模設備。

  高壓制備色譜的目的:

  制備色譜的目的支撐作用,是從混合物中得到純物質(zhì)。為了加快分離的時(shí)間與提高分離的效率至關重要,制備色譜的的進(jìn)樣品量很大著力提升,導(dǎo)致制備色譜柱子的分離負(fù)荷的相應(yīng)加大,也就必須加大色譜柱填料效率,增大制備色譜的直徑和長(zhǎng)度,使用的相對(duì)多的流動(dòng)相。然而建言直達,當(dāng)色譜柱上樣品負(fù)載加大的時(shí)候大幅拓展,往往導(dǎo)致柱效急劇下降而得不到純的產(chǎn)品。制備色譜大部分,要解決容量與柱子效果之間的矛盾重要工具,對(duì)重現(xiàn)性也要考慮。從經(jīng)濟(jì)上來(lái)說(shuō)更加堅強,高壓制備色譜要爭(zhēng)取少用填料提供有力支撐,少用溶劑,要盡可能多的得到產(chǎn)品配套設備。

  高壓制備色譜需要做的部分準(zhǔn)備工作:

  1.樣品的前處理:高壓制備色譜柱子由于處理的樣品多發展成就,比分析柱子更容易受污染,所以必要的前處理就顯得非常的必要建議。萃取優勢、過(guò)濾設計、結(jié)晶、固相萃取等簡(jiǎn)單的分離方法品率,如果用得上善謀新篇,而且還不是很麻煩,就要盡可能多的采用以去掉雜質(zhì)開展面對面。

  2.固定相的選擇:硅膠供給、鍵合固定相(如C18)、離子交換樹(shù)脂便利性、聚酰胺拓展應用、氧化鋁、凝膠等都可以作為色譜柱的填料效果較好。有不少文獻(xiàn)報(bào)道集聚效應,對(duì)填料可以進(jìn)行一下處理提高了分離效果貢獻,如廣泛應用,對(duì)硅膠進(jìn)行的硝酸銀(或緩沖液)處理。

  3.裝柱方法的選擇:根據(jù)固定相顆粒度和柱子的尺寸持續,采用不同的裝柱方法情況,往往裝填越好分離效果越好。裝柱效果跟填料的顆粒度關(guān)系很大核心技術,顆粒度的減少會(huì)導(dǎo)致裝柱的難度綠色化。一般來(lái)說(shuō),顆粒直徑小于20-30um的固定相采用濕法裝填創新能力。所謂“敲擊-裝填”技術(shù)適用于顆粒直徑大于25um的固定相至關重要。

  濕法的目的是迫使相對(duì)稀松的固定相懸漿以高速裝入色譜柱子,從而減少空隙的形成發展。然而改進措施,當(dāng)柱直徑大于20mm,所加壓力為30-40bar時(shí)效果,高壓懸漿裝填技術(shù)就變得十分復(fù)雜發展的關鍵。為將小顆粒固定相裝入更大得制備型色譜柱,可采用柱長(zhǎng)壓縮技術(shù)求得平衡。這種方法有所應,先將固定相懸漿(或偶爾是干填充物)裝入柱中加壓,利用物理方法將其壓緊面向。

  壓緊的方法有兩種:徑向壓縮和軸向壓縮今年。濕法裝柱需要一定的設(shè)備,在柱子填完后合作關系,應(yīng)用有柱效的測(cè)量真諦所在,對(duì)柱效低的柱子應(yīng)該重填工藝技術。

  4.流動(dòng)相的選擇:除了和分析色譜同樣的考慮外,在選用流動(dòng)相時(shí),要考慮色譜分離后面加有旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)等二次分離操作系統。一般來(lái)說(shuō),不宜采用高毒性溶劑規模,對(duì)多元溶劑要盡可能的少用逐步顯現。如果產(chǎn)品中含有大量溶劑,溶劑的純度也要考慮在其中。

  5.加樣的方法:一般的進(jìn)樣方法有用注射器進(jìn)樣近年來,用旋轉(zhuǎn)閥進(jìn)樣,通過(guò)六通閥進(jìn)樣事關全面,通過(guò)主泵進(jìn)樣交流等,通過(guò)輔泵進(jìn)樣,固體上樣發展目標奮鬥。

  6.泵的選用:根據(jù)有無(wú)脈沖自動化裝置、能承受的zui大壓力、控制的精度更優質、售后服務(wù)等來(lái)選擇泵成就。

  7.檢測(cè)器的選用:一般的分析池的zui大允許流速僅為5 mL/min 或者10mL/min。而專門(mén)的制備池的zui大允許流速可為150mL/min項目。有時(shí)相對開放,采用旁路分離管,將少量流體導(dǎo)入分析池進(jìn)行檢測(cè)綜合運用,是一個(gè)不錯(cuò)的辦法相貫通,但其濃度的誤差會(huì)相對(duì)較大。

  其他還有產(chǎn)品收集脫穎而出,分離以及柱轉(zhuǎn)換等等就不再一一詳述了系統,如果您有興趣了解更多高壓制備色譜的信息,上海宸喬生物科技有限公司技術發展。

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