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如何填充Alltech色譜柱的固定相

更新時間:2015-08-13      點擊次數(shù):2785
   Alltech色譜柱固定相的填充質(zhì)量影響Alltech色譜柱的分離度更默契了。而且,組分在Alltech色譜柱上的分離效果迎來新的篇章,主要取決于用在填充色譜柱的固定相解決方案。

  固定相填充質(zhì)量的好壞直接影響填充柱的柱效,因此共同學習,Alltech色譜柱固定相的填充方法也是很重要的交流研討。一根填充質(zhì)量較高的Alltech色譜柱,通常其理論塔板數(shù)應(yīng)該達(dá)到2000-3000/m,根據(jù)填充物粒度的大小順滑地配合,可分為濕法裝柱和干法裝柱。

  濕法裝柱是先把硅膠用適當(dāng)?shù)娜軇┌鑴蚝蟊∪觞c,再填入柱子中上高質量,然后再加壓用淋洗?走柱子",本法zui大的優(yōu)點是一般柱子裝的比較結(jié)實效高,沒有氣泡建設應用。干法裝柱則是直接往柱子里填入硅膠,然后再輕輕敲打柱子兩側(cè)廣度和深度,至硅膠界面不再下降為止應用的因素之一,然后再填入硅膠至合適高度,zui后再用油泵直接抽日漸深入,這樣就會使得柱子裝的很結(jié)實奮勇向前。接著是用淋洗劑"走柱子",一般淋洗劑是采用TLC分析得到的展開劑的比例再稀釋一倍后的溶劑強化意識。

  濕法裝柱和干法裝柱這二者各有優(yōu)劣聽得進,不論干法還是濕法,固定相的上表面一定要平整合理需求,并且固定相的高度一般為15cm左右全技術方案,太短了可能分離效果不好,太長了也會由于擴散或拖尾導(dǎo)致分離效果不好先進水平。為了獲得*的填充密度重要的,可選擇適當(dāng)?shù)募訅骸p壓或是手工填充的方法進行填充色譜柱搶抓機遇。

  (1)加壓法

  加壓法是將填充柱的一端塞好硅烷化的玻璃棉綠色化發展,另一端與填料池連接。先將固定相倒入填料池,填料池的另一端出口與氮氣或空氣鋼瓶的減壓閥連結(jié)應用創新。對于常見內(nèi)徑為4.5mm的填充柱體系,可調(diào)節(jié)氣流為30ml/min(氣流應(yīng)隨內(nèi)徑大小作相應(yīng)調(diào)整),將填充池內(nèi)的固定相壓入填充柱中和諧共生,同時用木棒輕敲填充柱體使固定相填充均勻提高。裝柱要求要填充得均勻,緊密用上了,切忌有空隙結構。固定相填充完畢后,在原來連接填充池的一端塞上硅烷化的玻璃棉的特性,注意這一端應(yīng)該與色譜儀的進樣室相連接競爭力所在,另一端作為出口端與檢測器相連接,不能接反高效。

  加壓柱是一種比較好的方法先進的解決方案,與常壓柱類似,只不過外加壓力使淋洗劑走的快些領域。壓力的提供可以是壓縮空氣研究進展,雙連球或者小氣泵(給魚缸供氣的就行)。特別是在容易分解的樣品的分離中適用。壓力不可過大溝通機製,不然溶劑走的太快就會減低分離效果。

  (2)減壓法

  減壓法一般用于填充長柱子大幅增加。這個方法采用真空泵抽氣平臺建設,將填充柱的一端塞好硅烷化的玻璃棉后與真空泵的緩沖安全瓶相連接。為了防止抽氣時潮濕空氣進入而使固定相性能受影響探討,可以在填料池加入固定相后新技術,在入氣口接氯化鈣和硅膠干燥塔培養,其他操作過程與加壓填充法相同共創美好。

  減壓柱能夠減少硅膠的使用量,感覺能夠節(jié)省一半甚至更多高效流通,但是由于大量的空氣通過硅膠會使溶劑揮發(fā)(有時在柱子外面有水汽凝結(jié))預判,以及有些比較易分解的東西可能得不到,而且還必須同時使用水泵抽氣(很大的噪音有力扭轉,而且時間長)調解製度。

  (3)手工填充法

  手工填充法一般只用于某些涂有沸點較低固定液的固定相的填充。通常采用邊裝邊敲打的辦法形式。每次加進柱內(nèi)的填料約5cm覆蓋範圍。填充時應(yīng)注意兩點:一是固定相要填充均勻和緊密適度,柱內(nèi)不留有死空間或者間隙;二是要避免填充過程中敲打振動過猛,造成固定相機械粉碎前沿技術。

  壓力可以增加淋洗劑的流動速度支撐作用,減少產(chǎn)品收集的時間,但是會減低柱子的塔板數(shù)深入交流。所以其他條件相同的時候解決,常壓柱是效率zui高的,但是時間也zui長動力。

  所以不斷豐富,我們可以根據(jù)不同的Alltech色譜柱,選擇合適的固定相填充方法多種方式。

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