中壓層析柱是凝膠層析技術(shù)中的主體就能壓製，一般用玻璃管或有機(jī)玻璃管。根據(jù)樣品混合物中各組分在固定相和流動相中分配系數(shù)不同產能提升，從而分離的一種層析法發揮。
下面讓我們一起來了解一下中壓層析柱的操作方法吧
以中壓層析法提取分離冬凌草甲素為例
1、吸附劑的處理及柱子裝填
將一定量薄層層析硅膠裝人搪瓷盤置于烘箱中適應能力，于105C活化2H后設施，取出放置室溫即可裝柱。柱子采用干法填充快速增長，填滿整個柱體要求，不留死體積，密封后用柱塞式計量溶劑泵按丙酮一石油醚(5:95)比例泵人溶劑通過活化，至溶劑流出止開放以來。
2、上樣
將冬凌草的乙醇提取物400G用適量丙酮溶解防控，泵人中壓柱柱頭組合運用，然后泵人石油醚1000RID。
3高質量、洗脫
以一定比例的石油醚一丙酮為洗脫液研究與應用，60ML/MIN的流速進(jìn)行梯度洗脫，柱的使用壓力為2~ 3KG/C 指導。按每份500ML收集建設項目，TLC檢識展開劑丙酮一(2:8)，顯色劑5%香草醛濃硫酸乙醇液
至洗脫*服務品質，相同流份合并傳遞，回收溶劑。將冬凌草甲素流份合并蒸干過程。加人適量甲醇熱溶后自然放置經過，析出結(jié)晶帶來全新智能，為冬凌草甲素。
4核心技術體系、層析柱再生自主研發、平衡
有效成分經(jīng)TLC檢識全部流出后，用純丙酮5000ML再生新產品，丙酮一石油醚(5:95)平衡后意向，可再次上樣，反復(fù)使用(使用次數(shù)隨原料不同而異更加廣闊，一般可連續(xù)使用2-6個月以上)系統性。
5、重結(jié)晶
冬凌草甲素結(jié)晶析出*后，減壓過濾損耗，然后用少量甲醇洗滌(洗滌液保留，作下次熱溶冬凌草甲素用)長遠所需。將冬凌草甲素再用適量甲醇熱溶后放置形式，結(jié)晶再次析出，待結(jié)晶*后非常完善，抽濾傳遞，用少量洗滌，將結(jié)晶室溫下晾干后置真空干燥箱中非常重要，35度真空干燥至恒重實事求是。密封于瓶中，置干燥器中保存行動力。
6結構、薄層層析分析
取適量冬凌草甲素對照品及由上述方法得到的冬凌草甲素樣品甲醇溶解后點于同一硅膠G薄層板上，以一丙酮(8:2)為展開劑進(jìn)行展開落到實處，5% 香草醛濃硫酸乙醇液顯色效果，于105。C烘至斑點清晰營造一處。表明在該展開系統(tǒng)下服務水平，冬凌草甲素樣品和對照品都具有相同的RF值，并呈現(xiàn)出同樣的藍(lán)綠色斑點保供，在制備的冬凌草甲素樣品中能力建設，沒有雜質(zhì)斑痕。
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